来源:正一 浏览人数:108 次更新时间:2022.10.21
结合我们3年的临床经验,
总结了PCR实验室核酸污染避坑指南!
三、核酸污染的解决方案
首先针对上述产生气溶胶污染的原因进行分析,从人员、硬件配置、物料、方法(SOP)、环境五个方面进行认真复盘,整改,查找污染原因。这是保证实验室长治久安、不发生污染的基本前提。
NO2. 清理工作
丢弃3个分区的所有用过的耗材(主要是tip吸头和离心管、拆开的试剂盒等)、非一次性实验服工作服应用次氯酸盐溶液浸泡1小时后,进行洗涤处理;尽量使用一次性生物安全Ⅱ级防护服或实验服;专区专人处理。
NO3. 空气中
空气中的核酸气溶胶的清除,可以依靠紫外线照射12~18小时,但是注意,紫外线作用距离在80cm~100cm之间,且对200bp以下的短片段核酸不敏感。容易留死角。
也可以使用纳克生物NKB®YNKBJ-1型“PCR CLEANER 核酸气溶胶污染清除仪”按照1区、2区、3区的顺序依次定时处理2小时。可以解决紫外线的痛点。
NO4.物表
吸附在仪器设备等物体表面上的核酸污染处理:使用没有腐蚀性的核酸清除剂。例如使用酶解法(耐热核酸降解酶)的清除剂,处理移液器、生物安全柜、离心机、传递窗等区域进行喷洒清除。静置15分钟即可。
注意:试验耗材、工作衣等进行121℃30分钟高压,虽然有一定的作用,并不能完全去除质粒核酸的污染。
NO5.预防方案
每天实验结束,使用NKB®的YNKBJ-1型“PCR CLEANER 核酸气溶胶污染清除仪”在2区和3区,定时处理2个小时,清除潜在的核酸污染物。
全员筛查或高频使用时,在每轮PCR实验的间隙,用NKB®的酶解法(耐热核酸降解酶)的清除剂喷洒高污染风险区域如:生物安全柜、移液器等,清除潜在的核酸污染物。